流式荧光杂交法检测女性妇科门诊人群和体检人群的HPV基因型

中国医药导报２０１３年ｌ１月第ｌＯ卷第３２期　调查研究・　流式荧光杂交法检测女性妇科门诊人群　和体检人群的ＨＰＶ基因型　陈占国　李艳　武汉大学人民医院检验科，湖北武汉４３００６０　【摘要】目的比较女性门诊人群和体检人群人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染情况及常见基因型的差异。方法采用流式荧光　杂交方法检测２０９８例门诊人群和同期２７３０例体检人群女性宫颈脱落细胞标本的ＨＰＶ分型。分析两类人群的ＨＰｖ感　染率、感染类型、常见亚型以及不同年龄段ＨＰＶ感染类型的差异。结果门诊人群和体检人群总感染率为３９＿３７％　（８２６／２０９８）比１７．３６％（４７４／２７３０），其中单一亚型感染为２９．７９％比１４．１７％（高危亚型为２５．８３％比１１．７６％，低危亚型为　３．９６％比２．４１％），多重感染为９．５８％比３．１９％（两重感染占６．８２％比２．６７％，两重以上感染占２．７６％比０．５２％）。门诊人群　常见的ＨＰＶ亚型为ＨＰＶ５２（２２．０３％）、１６（１９．３７％）、５８（１４．６５％）、３３（７．５１％）、５６（７．５１％）、６（５．２１％）、６１（４．１２％），体检人　群常见的ＨＰＶ亚型为ＨＰＶ５２（２０．４６％）、５８（１５＿４０％）、６１（９．７０％）、３９（８．Ｏ２％）、１６（７．３８％）、６８（６．９６％）、４４（５．２７％）。门诊　人群和体检人群之间，ＨＰＶ阳性检出率的差异有统计学意义（）（　＝２９２．０３，Ｐ＜０．ｏ１），且门诊人群多重感染率高于体检人　群（ｘ　＝６．２４４，Ｐ＜０．０５）。两类人群单一亚型感染以３１　５Ｏ岁为主，多重感染以两重和三重感染为主，但门诊人群比体检　人群的四重和五重感染多见；体检人群的两重感染率最高是＞４０—５０岁，而门诊人群的两重感染最高是３１—４０岁，门诊　人群多重感染程度有随年龄增加而加重的趋势。结论门诊人群的ＨＰＶ感染率和多重感染率明显高于体检人群，体　检人群ＨＰＶ感染以５２和５８亚型为主，门诊人群以５２、１６和５８亚型为主，本院女性门诊人群和体检人群ＨＰＶ感染有　一定的区域特征性。　【关键词】流式荧光杂交法；人乳头瘤病毒；基因型；感染　［中图分类号】Ｒ４４０　【文献标识码】Ｃ　［文章编号】１６７３—７２１０ｆ２０１３）１１（ｂ）一０１２３—０５　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｌｆｏｗ　ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｗｏｍｅｎ　ｆｒｏｍ　ｂｏｔｈ　ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ＣＨＥＮＺｈａｎｇｕｏ　ＬＩＹａｈ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｒｅｎｍｉｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｗｕｈａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｂｅｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｗｕｈａｎ　４３００６０，Ｃｈｉｎａ　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｆ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ｉｎ　ｆｅｍａｌｅ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ｗｉｔｈ　ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　２０９８　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｅｘｆｏｌｉａｔｅｄ　ｃｅｌｌ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｆｒｏｍ　ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｏｕｔ—　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｎｄ　２７３０　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｉｄｅｎｔｉｃａｌ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｆｌｏｗ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　ＨＰＶ，ｔｈｅ　ｔｙｐｅ　ｏｆ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃ。　ｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｇｅ　ｉｎ　ＨＰＶ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　ＨＰＶ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ｗａｓ　３９．３７％（８２６／２０９８）　ｓ　１７．３６％（４７４／２７３０）．ｉｎ　ｗｈｉｃｈ　ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　２９．７９％　ｓ　１４．１７％（ｈｉｇｈ—ｒｉｓｋ　ｓｕｂｔｙｐｅ：２５．８３％ｖｓ　１　１．７６％，ｌｏｗ－ｒｉｓｋ　ｓｕｂｔｙｐｅ：３．９６％　ｓ　２．４１％）ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　９．５８％ｙｓ　３．１９％（ｄｏｕｂｌｅ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ：　６．８２％　ｓ　６．８２％，ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　ｄｏｕｂｌｅ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ：２．７６％　ｓ　０．５２％）．Ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ＨＰＶ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ＨＰＶ－５２（２２．０３％），１６（１９．３７％），５８（１４．６５％），３３（７．５１％），５６（７．５ｌ％），６（５．２１％），ａｎｄ　６１（４．１２％），ｗｈｉｌｅ　ｉｎ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ＨＰＶ－５２（２０．４６％），５８（１５．４Ｏ％），６１（９．７Ｏ％），３９（８．Ｏ２％），１６（７．３８％），６８（６．９６％），ａｎｄ　４４（５．２７％）．Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ａ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＨＰＶ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ（　＝　２９２．０３，Ｐ＜０．０１）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ（ｘ　＝６．２４４，Ｐ＜　０．０５）．Ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｓｕｂｔｙｐｅ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗａｓ　ｃｏｍｍｏｎ　ｉｎ　ｗｏｍｅｎ　ｗｈｏ　ｗａｓ　３　１　ｔｏ　５０　ｙｅａｒｓ　ｏｌｄ，ａｎｄ　ｈｔｅ　ｍａｉｎ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｉｎ—　ｆｅｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｏｕｂｌｅ　ａｎｄ　ｔｉｒｐｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｍｏｒｅ　ｑｕａｄｒｕｐｌｅ　ａｎｄ　ｑｕｉｎｔｕｐｌｅ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ．Ｗｏｍｅｎ　ｗｈｏ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｄｏｕｂｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　４０　ｔｏ　５０　ｙｅａｒｓ　ｏｌｄ　ｉｎ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ａｎｄ　３　１　ｔｏ　４０‘ｙｅａｒｓ　ｏｌｄ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｍｕｈｉｐｌｅ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｌｏｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ　ａｇｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｈａｖｅ　ｍｏｒｅ　ＨＰＶ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ．Ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ＨＰＶ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｉｎ　ｃｈｅｃｋ—ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ａｒｅ　５２　ａｎｄ　５８．ｗｈｉｌｅ　ｉｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｔｈｅｙ　ａｒｅ　５２．１６　ａｎｄ　５８．Ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｅｃｋ－ｕｐ　ｃｒｏｗｄ　ｗｉｔｈ　ＨＰＶ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｈａｖｅ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｇｉｏｎａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｆｌｏｗ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ；Ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｍｓ；Ｇｅｎｏｔｙｐｅ；Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　［基金项目】国家Ｉｆ缶床重点专科建设项目（编号财社ｆ２Ｏ１０］３０５号）。　‘通讯作者　ＣＨＩＮＡ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＨＥＲＡＬＤ　Ｖｏ１．１　０　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１　３　Ｎｏ．３２　・调查研究・　中国医药导报２０１３年１１月第１０卷第３２期　子宫颈癌是危及广大妇女生命的主要杀手，且呈　交板中加入２２　Ｌ预混的微球杂交液，依此加入３　Ｌ　现出年轻化趋势。研究表明，人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎ　ＰＣＲ扩增产物至微孔杂交板中，并吹打混匀，封板纸　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）持续感染与子宫颈癌发病密切　相关。系统有效的筛查是降低子宫颈癌发病率和病死　率的最有效手段【　。目前，ＨＰＶ已鉴定出１００多种型　别。根据致病性大小，将ＨＰＶ分为低危型和高危型两　人群及体检人群的ＨＰＶ感染情况及亚型分布，了解　两类人群ＨＰＶ携带的差异，为女性患者的宫颈癌预　覆盖。９５℃变性５　ｍｉｎ，４８℃杂交３０　ｍｉｎ。杂交完毕后，　小心将封板纸撕下，每孔加入荧光素ＳＡ—ＰＥ　７５　Ｌ，　封板纸重新覆盖．轻轻混匀后４８℃孵育１５　ｍｉｎ。　１－３．４结果判读将微孔杂交板移至预热好的Ｌｕ—　大类。本研究采用流式荧光杂交法检测本院女性门诊　ｍｉｎｅｘ　２００多功能流式点阵仪上检测，读取微球编码　及其对应的荧光强弱信号，经配套分析软件判读检测　结果。此法可检测ｌ９个高危亚型（即１６、１８、３１、３３、　３５、３９、４５、５１、５２、５６、５８、５９、６６、２６、５３、５５、６８、８２、８３）　防筛查和瘤苗研制奠定基础。　１对象与方法　１．１对象　和７个低危亚型（即６、１１、４０、４２、４４、６１、７３）。　１．４统计学方法　研究对象来源于２０１３年３月～２０１３年６月武汉　大学人民医院（以下简称“我院”）妇科门诊和体检中　利用ＳＰＳＳ　１７．０统计软件对实验数据进行整理和　统计分析，比较门诊人群和体检人群的不同ＨＰＶ亚　型检出率、感染类型及不同年龄组ＨＰＶ亚型分布特　征，检出率以阳性率（％）表示，计数资料采用ｘ　检验，　以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　心；①门诊人群：自愿接受生殖道ＨＰＶ筛查的妇科门　诊女性，共２０９８例，年龄１９～８３岁，平均（３９．９￣９．９）岁；　②体检人群：自愿接受生殖道ＨＰＶ筛查的体检中心女　性，共２７３０例，年龄１９—７９岁，平均（４３．０＋９．６）岁。所　２结果　有研究对象均签署知情同意书。所有研究对象均有性　２．１女性门诊人群和体检人群的ＨＰＶ感染情况及感　生活史，孕妇和月经期女性不参与本次调查，无子宫　切除史和盆腔放疗史，两年内均未进行妇科宫颈手　术。采集宫颈脱落细胞标本，用棉拭子将宫颈口过多　的分泌物擦去，然后用宫颈刷插入宫颈口．紧贴宫颈　口单方向旋转３～５圈，将宫颈刷头部折断放入标本保　成检测）。　１．２主要仪器和试剂　染类型　门诊人群共２０９８例．ＨＰＶ阳性８２６例．ＨＰＶ总　感染率为３９．３７％；单一亚型感染６２５例（２９．７９％），其　中单一高危亚型感染５４２例（２５．８３％），单一低危亚型　感染８３例（３．９６％）；多重感染２０１例（９．５８％），其中两　存液管中，旋紧盖子。贴好医嘱条形码送检（４８　ｈ内完　重感染１４３例（６．８２％），三重感染４１例（１．９５％），四重　感染１２例（０．５７％），五重感染５例（０．２４％）。体检人　群共２７３０例，ＨＰＶ阳性４７４例，ＨＰＶ总感染率为　１７．３６％；单一亚型感染３８７例（１４．１７％），其中单一高危　亚型感染３２１例（１１．７６％），单一低危亚型感染６６例　（２．４１％）；多重感染８７例（３．１９％），其中两重感染７３例　（２．６７％），三重感染ｌ２例（０４４％），四重感染ｌ例（０Ｏ４％），　五重感染１例（０．０４％）。门诊人群和体检人群之间，　ＡＢＩ２７２０普通扩增仪（美国ＡＢＩ公司）、Ａｌｌｅｇｒａ一　６４Ｒ低温高速离心机（美国Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ公司）、　Ｌｕｍｉｎｅｘ２００多功能流式点阵仪（美国Ｌｕｍｉｎｅｘ公司）、　高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒（上海透景生命　科技有限公司）。　１．３方法　ＨＰＶ阳性检出率的差异有统计学意义（Ｘ２＝２９２．０３，Ｐ＜　０．０１），且门诊人群多重亚型感染明显高于体检人群　（Ｘ２＝６．２４４，Ｐ＜０．０５），分别见表１和表２。　表１　门诊人群和体检人群的阳性检出率比较［ｎ（％）】　１．３．１标本ＤＮＡ提取取混匀的待测标本及阳性质控　品２００　ＩｘＬ，１４　０００　ｒ／ｍｉｎ离心３　ｍｉｎ，弃上清后加入　２００　Ｌ预先摇匀的提取缓冲液，振荡混匀后置１００￣Ｃ　水浴１５　ｍｉｎ，１４　０００　ｒ／ｍｉｎ离心５　ｒａｉｎ后，取５　Ｌ上　清作为ＰＣＲ反应模板。　１．３．２　ＰＣＲ扩增每个ＰＣＲ反应体系总体积为２Ｏ　Ｌ，　包括５　Ｌ模板和１５　ｔｘＬ　ＰＣＲ试剂，ＰＣＲ试剂按以下　比例配制，即ＰＣＲ预混液１Ｏ　ＩｘＬ、引物混合液５　Ｌ、　聚合酶０．８　ｔｘＬ。反应参数为：９５℃５　ｍｉｎ：９５℃３０　Ｓ，　５８℃３０　Ｓ，７２℃３０　Ｓ，５个循环；９５℃３０　Ｓ，５５℃３０　Ｓ，　７２。【＝３０　Ｓ，３５个循环；最后７２℃３　ｍｉｎ。　表２门诊人群和体检人群的单一亚型和多重亚型感染｝Ｂ较　（％）】　注：与体检人群比较，Ｘ￣＝２９２．０３，　＜０．０ｌ；ＨＰＶ：人乳头瘤病毒　１．３．３核酸杂交及荧光素标记按照样本个数，微孔杂　ＣＨＩＮＡ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＨＥＲＡＬＤ　Ｖｏ１．１０　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１３　Ｎｏ．３２　注：与体检人群比较，￣２－６．２４４，．尸＜Ｏ．０５　中国医药导报２０１３年１１月第１０卷第３２期　・调查研究・　２．２女性门诊人群和体检人群ＨＰＶ感染者的不同亚　染随年龄增加，阳性率有下降趋势，低危型多与高危　型检出情况　型多重感染，而多重感染以３１　４０岁组．＞５０岁组可　两类人群不同ＨＰＶ亚型按照检出率从高到低排　列，见表３。门诊人群ＨＰＶ感染者，２６种亚型均有被　３位为ＨＰＶ６１、４４、６；在体检人群ＨＰＶ感染者。２６种　亚型均有被检到，高危型前５位为ＨＰＶ５２、１６、５８、　３３、５６，而低危型前３位为ＨＰＶ６、６１、１１。　表３门诊人群和体检人群ＨＰＶ感染者的不同亚型检出情况　（ｎ　）】　门诊人群　ＨＰＶ　见６例四重感染和３例五重感染，门诊人群多重感染　程度有随年龄增加而加重的趋势；体检人群单一亚型　重感染为主，两重感染率最高是＞４０～５０岁组．＞５０岁　组各有检到１例四重和五重感染。　３讨论　４　３　ｌ　检到，高危型前５位ＨＰＶ５２、５８、３９、１６、６８，低危型前　感染以３１　０岁组和＞４０　５０岁组为主，多重感染以两　２　ＨＰＶ分型对于子宫颈癌癌症筛查、随访监控、疗　乃　效评估以及疫苗研发具有重要作用［２１。流式荧光杂交　体检人群　中　亚型　阳性隋况Ｈ　技术是一种液相生物芯片技术。它与其他传统的　隋况Ｈ　譬　中　０．１２（１／４７４）　４　３　ＨＰＶ分型检测方法比较，具有明显的优势．该方法具　一一一一一１　２　高危型　１６　１．２８（３５，２０９８）７．３８（３５／８２６）７．６３（１６０／２７３０）１９．３７（１６Ｏ／４７４）　有操作简便、高通量（１次性９６个样本检测）、高灵敏　度（低至１０拷贝）、重复性好和特异性强等优点，是如　今国内检测ＨＰＶ分型的较理想方法之一　。　１．０３（２８／２０９８）５．９１（２８／８２６）２．５３（５３／２７３０）　６．４２（５３／４７４）　０．０７（２，２ｏ９８）０．４２（２／８２６）０．０５（１，２７３０）１８　２６　一一一一一３１　３３　０．７Ｏ（１９，２０９８）４．０１（１９／８２６）２．０５（４３／２７３０）　５．２１（４３／４７４）　０．７０（１９／２０９８）４．０１（１９／８２６）２．９６（６２／２７３０）　７．５１（６２，４７４）　本研究调查女性门诊人群和体检人群ＨＰＶ感染　的情况，在２０９８例门诊人群中，证实有ＨＰＶ阳性　８２６例为ＨＰＶ阳性携带。其阳性检出率为３９．３７％，而　在２７３０名女性体检者中。证实有４７４例为ＨＰＶ阳性　携带．其阳性检出率为ｌ７．３６％．门诊人群ＨＰＶ感染　３５　３９　４５　０．１８（５／２０９８）　１．０５（５／８２６）　１．１９（２５／２７３０）　３．０３（２５／４７４）　１．３９（３８／２０９８）８．０２（３８／８２６）１．６７（３５／２７３０）４．２４（３５／４７４）　Ｏ．３３（９／２０９８）　１．９０（９／８２６）０．５７（１２，２７３０）　１．４５（１２／４７４）　５１　５２　５３　５５　Ｏ．４８（１３／２０９８）２．７４（１３／８２６）１．６２（３４１２７３０）４．１２（３４／４７４）　３．５５（９７／２０９８）２０．４６（９７／８２６）８．６７（１８２／２７３０）２２．０３（１８２／４７４）　０．６２（１７／２０９８）３．５９（１７／８２６）１．１９（２５／２７３０）　３．０３（２５／４７４）　０．６２（１７／２０９８）３．５９（１７／８２６）１．００（２１／２７３０）　２．５４（２１／４７４）　率明显高于女性体检人群（Ｐ＜０．０１），且门诊人群多　重亚型感染率高于体检人群（Ｐ＜０．０５）。体检人群　ＨＰＶ感染以单一感染为主（检出率１４．１７％），低于门　５６　５８　５９　６６　６８　１．０６（２９／２０９８）６．１２（２９／８２６）２．９６（６２１２７３０）　７．５１（６２／４７４）　２．６７（７３／２０９８）１５．４０（７３／８２６）５．７７（１２ｌ／２７３Ｏ）１４．６５（１２１／４７４）　０．４４（１２１２０９８）２．５３（１２／８２６）１．３８（２９／２７３０）　３．５１（２９／４７４）　０．４０（１１／２０９８）２．３２（１１／８２６）１．４３（３０／２７３０）　３．６３（３０／４７４）　１．２１（３３／２０９８）６．９６（３３／８２６）１．７２（３６／２７３０）４．３６（３６／４７４）　诊人群（２９．７９％），体检人群ＨＰＶ多重感染以两重感　染和三重感染为主，四重感染和五重感染少见，仅见　于２名５６岁女性体检者。门诊人群ＨＰＶ感染虽以单　一８２　８３　低危型　６　Ｏ．５５（１５／２０９８）３．１６（１５／８２６）０．６２（１３／２７３０）　１．５７（１３／４７４）　０．０４（１１２０９８）０．２１（１／８２６）０．１９（４／２７３０）０．４８（４／４７４）　感染为主（检出率２９．７９％），其多重感染率（９．５８％）　明显高于体检人群（３．１９％），多重感染以两重和三重　感染为主。四重和五重感染例数明显增加。研究结果　提示，门诊人群的高单一感染率和多重感染率可能与　宫颈病变的严重性相关，应该引起临床重视。ＨＰＶ感　染在不同地区．不同人群中所占的主要型别有所不　０．３７（１０／２０９８）２．１１（１０／８２６）　１１　４０　０．２２（６／２０９８）　１．２７（６／８２６）　０．２９（８／２０９８）　１．６９（８／８２６）　４２　４４　０＿３３（９／２０９８）　１．９０（９／８２６）　０．９２（２５／２０９８）５．２７（２５／８２６）　６１　７３　１．６８（４６／２０９８）９．７０（４６／８２６）　０．Ｏ４（１／２０９８）０．２１（１／８２６）　同，ＨＰＶ分型检测有利于各地研究、使用疫苗进行　ＨＰＶ感染的预防控制。世界范围不同地区的ＨＰＶ致　病亚型存在较大差异。在中国。ＨＰＶ１６、１８、３１、３３、４５　和５８等亚型均有报道。全国各地区总体以ＨＰＶ１６为　２．３门诊人群和体检人群ＨＰＶ感染类型的不同年龄　分布　主［５－７１．而ＨＰＶ５８的检出率有升高的趋势，有些地区与　ＨＰＶ１６几乎持平，我国地域辽阔，不同民族和地区之　间也存在差异。在本研究中，在门诊人群与体检人群　考虑ＨＰＶ感染的年龄差异，将门诊人群与体检人　群按照年龄段分为４组。两类人群的＜３１岁组、３１～　均有检到２６种ＨＰＶ亚型，体检人群高危型以　４０岁组、＞４０～５０岁组、＞５０岁组ＨＰＶ阳性检出率差　ＨＰＶ５２、５８、３９、１６、６８为主，低危型以ＨＰＶ６１和４４为　异均具有统计学意义，ｘ　值分别为２６．５２（Ｐ＜０．０１）、　８３．５４（Ｐ＜０．０１）、８３．９３（Ｐ＜０．０１）、１３４．９８（Ｐ＜０．０１），　主，ＨＰＶ２６阳性见于两重亚型感染者（即ＨＰＶ２６和５３），　而ＨＰＶ７３阳性见于四重亚型感染者（即ＨＰＶ４５、５２、５６　和７３）。门诊人群高危型则以ＨＰＶ５２、１６、５８、３３、５６为　详见表４。从表４可见，门诊人群单一高危亚型感染　以３１～４０岁组和＞４０—５０岁组为主，单一低危亚型感　主．低危型以ＨＰＶ６和６１为主。体检人群携带的主要　ＣＨＩＮＡ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＨＥＲＡＬＤ　Ｖｏ１．１　０　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１　３　Ｎｏ．３２　・调查研究・　中国医药导报２０１３年ｌ１月第１０卷第３２期　表４门诊人群和体检人群不同年龄组的ＨＰＶ感染类型与阳性检出率［ｎ（％）】　注：ＨＰＶ：人乳头瘤病毒　基因型为ＨＰＶ５２（２０．４６％）和５８（１５．４０％），门诊人群　携带的主要基因型为ＨＰＶ５２（２２．０３％）、１６（１９．３７％）　和５８（１４．６５％），说明了本院女性ＨＰＶ５２和ＨＰＶ５８亚　总之，我院女性门诊人群与体检人群ＨＰＶ感染　者的基因型有地区特征性，单一感染以高危亚型感染　为主，混合感染以两重亚型感染为主，３１～５０岁之间　型具有较高人群感染率。另外，门诊人群ＨＰＶ１６感　ＨＰＶ感染率最高．但门诊人群的ＨＰＶ阳性检出率和　染率略微低于ＨＰＶ５２，ＨＰＶ６是最常见的低危型，　多重感染率高于体检人群，且所感染的主要基因型也　且大都与其他高危型混合感染，本研究认为高危型　ＨＰＶ１６和低危型ＨＰＶ６可能与门诊人群的宫颈癌致　的略有差异［５－７］。但也验证了ＨＰＶ５８具有较高的人群　有所不同，主要ＨＰＶ亚型可能与致病性相关。　【参考文献】　ｄｏｕｂｌｅ－ａｎｄ　ｔｒｉｐｌｅ－ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｔｅｓｔｉｎｇ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　Ｐａｐ　ｔｅｓｔ，ＨＰＶ　ＤＮＡ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　ｃｅｒｖｉｃｏｇｒａｐｈｙ，ａｓ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　１】Ｋｉｍ　ＪＨ，Ｋｉｍ　ＩＷ，Ｋｉｍ　ＹＷ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｓｉｎｇｌｅ一，　病性相关。以上主要亚型检出率与国内其他文献报道　［感染率【８＿９】，ＨＰＶ５２高感染率也说明了女性ＨＰＶ感染　的严重程度以及感染的亚型分布与区域流行密切相　关［　垌。　宫颈癌是目前唯一病因明确的恶性肿瘤．是目前　唯一可以预防的恶性肿瘤。本研究对本地区女性门诊　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｕｔｅｉｒｎｅ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｃａｎｃｅｒ［　Ｏｎｃｏｌ　Ｒｅｐ，２０１３，２９　（４）：１６４５—１６５１．　［２】Ｃｉｓｚｅｋ　Ｂ，Ｈｅｉｍｒａｔｈ　Ｊ，Ｃｉｓｚｅｋ　Ｍ．Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｅｏｐｌａｓｍ　ｌｅｓｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｖｉｒｘ　ｏｆ　ｗｏｍｅｎ　ｗｉｔｈ　ａｂｎｏｒｍａｌ　ｃｙｔｏｌｏｇｙ　ｓｍｅａｒｓ叨．　Ａｄｖ　Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ｍｅｄ，２０１２，２１（６）：７５９—７６６．　人群与体检人群ＨＰＶ感染者不同年龄分布进行分　析，两类人群单一亚型感染（包括高危型和低危型）以　３１～４０岁组和＞４０～５０岁组为主，说明了３ｌ　５０岁之间　的女性ＨＰＶ感染率保持相对稳定的水平和ＨＰＶ感　【３】Ｓｕｔｈｉｐｉｎｔａｗｏｎｇ　Ｃ，Ｓｉｒｉａｕｎｋｇｕｌ　Ｓ，Ｔｕｎｇｓｉｎｍｕｎｋｏｎｇ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．　Ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａ　ｖｉｕｓ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ，ｇｅｎｏｔｒｙｐｅ　ｄｉｓｔｉｂｕｔｒｉｏｎ，　ａｎｄ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｏｆ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｔｈａｉ　ｗｏｍｅｎ［Ｊ］．Ａｓｉａｎ　Ｐａｃ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｐｒｅｙ，２０１　１，１２（４）：８５３－８５６．　染难清除性。另外，体检人群多重感染以两重和三重　感染为主，两重感染率最高是＞４０～５０岁组。四重和五　重感染少见：门诊人群多重感染以３１～４０岁组主，多　重感染程度随年龄增加而加重的趋势。这提示了，女　性在＞４０～５０岁年龄段ＨＰＶ携带率较高．特别是ＨＰＶ　高危亚型及多重感染者．ＨＰＶ分型检测应结合细胞　学检查，应建议患者进行妇科随访。若连续两次ＨＰＶ　分型检测显示单一型别的高危亚型感染．提示宫颈　癌发生的可能性很大，应引起极大重视。ＨＰＶ基因分　【４］廖光东，刘彬，陈凤，等．流式荧光杂交法检测高危型人乳头　瘤病毒的临床价值［Ｊ］．肿瘤，２００８，２８（５）：４３１—４３５．　【５］Ｗｕ　ＥＱ，Ｌｉｕ　Ｂ，Ｃｕｉ　ＪＦ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｙｐｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｈｕ－　ｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｕｓ　ａｎｄ　ｐａｐ　ｒｅｓｕｈｓ　ｉｒｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｏｍｅｎ：ａ　ｍｕｌｔｉ—ｃｅｎｔｅｒ，ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ—ｂａｓｅｄ　ｃｒｏｓｓ—ｓｅｃｔｉｏｎａｌ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃａｕｓｅｓ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，２０１３，２４（４）：７９５—８０３．　［６　Ｓｈｅｎ　Ｙ，６］Ｇｏｎｇ　ＪＭ，Ｌｉ　ＹＱ，ｅｔ　ａ１．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ｄｉｓｔｉｂｕｔｒｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）ｉｎ　ｗｏｍｅｎ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ【Ｊ】．Ｃｌｉｎ　Ｃｈｉｍ　Ａｃｔａ，２０１３，４１５：２９７－３０１．　［７］Ｗａｎｇ　Ｘ，Ｇｕ　Ｄ，Ｌｏｕ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ｈｏｓｐｉｔａｌ－ｂａｓｅｄ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ＨＰＶ　ｔｙｐｅｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　型检测结果对宫颈病变患者手术前后随访提供依据。　若治疗前后ＨＰＶ为同一亚型阳性，复发的可能性大。　如果是其他亚型阳性，则为重复感染，手术病灶切除　干净。　ａｎｄ　ｆｅｍａｌｅ　ｓｅｘ　ｗｏｒｋｅｒｓ　ｉｎ　Ｈｕｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｇｙｎａｅｃｏｌ　Ｏｂｓｔｅｔ，２０１３，１２０（１）：３７—４１．　（下转第１３１页）　ＣＨＩＮＡ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＨＥＲＡＬＤ　Ｖｏ１．１　０　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１　３　Ｎｏ．３２